《中国生物制品规程》治疗用布氏菌病菌苗制造及检定规程·

本品系用弱毒牛型布氏菌经加热杀菌制成。专供治疗亚急性、慢性布氏菌病使用。

1 菌种

有关菌种的规定及菌种检定按《冻干皮上划痕人用布氏菌病活菌苗制造及检定规程》1.1～1.4项及1.5.1～1.5.5项执行。

2 制造

2.1 可用肝浸液琼脂或其他适宜培养基制造。

2.2 启开冻干菌种，接种于肝琼脂斜面或其他适宜培养基上，37℃培育44～48小时为第1代菌种。第1代菌种在2～8℃可以保存15日。

2.3 将第1代菌种移种肝琼脂或其他适宜培养基上，放37℃培育44～48小时，为第2代菌种，经肉眼纯菌检查合格后，用灭菌生理盐水洗下菌苔制成悬液。

2.4 用第2代菌悬液接种肝琼脂或其他适宜培养基，放37℃培育44～48小时，肉眼逐瓶检查，有杂菌者废弃。

2.5 用灭菌生理盐水洗下菌苔或刮取菌苔，制成菌液。用绸布袋过滤，合并至灭菌瓶内。

2.6 合并后菌液按中国细菌浊度标准将菌液的浓度调为每ml含150亿～300亿菌，随后放70～80℃水浴摇动1小时杀菌。

2.7 无菌试验

除按《生物制品无菌试验规程》进行外，另接种2管肝琼脂斜面，放37℃培育7天，应无杂菌及本菌生长。

2.8 用灭菌生理盐水将无菌试验合格的菌液稀释为含菌30亿/ml，稀释后应取样做无菌试验，不应有菌生长。

2.9 菌苗内不加防腐剂。稀释菌液分装安瓿后应加热70～80℃1小时。

3 成品检定

3.1 物理性状检查

菌苗应呈均匀菌悬液，无摇不散的菌块及异物。

3.2 无菌试验

按《生物制品无菌试验规程》进行。

3.3 浓度测定

按中国细菌浊度标准测定。每ml含菌30亿±20%。

3.4 鉴别试验

菌苗应与布氏菌诊断血清发生凝集反应。

3.5 安全试验

每批菌苗用体重18～20g小白鼠5只，每只皮下注射0.5ml，注射后7日内小白鼠不得有死亡。凡有死亡者应复试，仍有死亡者则该批菌苗应废弃。

4 保存与效期

应保存于2～8℃。自检定合格之日起效期为2年。